制备色谱

制备色谱

制备色谱是指采用色谱技术制备纯物质,即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备色谱中的“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物,以满足研究和其它用途。制备色谱的出现,使色谱技术与经济利益建立了联系...
制备色谱是指采用色谱技术制备纯物质,即分离、收集一种或多种色谱纯物质。制备色谱中的“制备”这一概念指获得足够量的单一化合物,以满足研究和其它用途。制备色谱的出现,使色谱技术与经济利益建立了联系。制备量大小和成本高低是制备色谱的两个重要指标。其中,气相制备色谱主要用于石油化工产品和挥发性天然产物的色谱纯样品制备。
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用RID-10A检测器,按照出峰顺序手动制备收集的流分可能是混合物吗?收集的流分被冷冻干燥后经过液-质联用检测后,每一个流分几乎都含有相同的成分,都是混合物不是纯净物,这是怎么回事?

物质是否能够分离开最关键的是色谱柱的选择,而示差折光检测器仅是从物质的折光系数来判断是否是相同的。所以你用RID检测器看到的独立组分极有可能是混合物,而不是你希望的纯物质。所以你也不用惊讶。

建议:你的这个问题的核心在于色谱柱的选型,即选择合适的色谱柱及色谱条件把你希望的组分分离开,再考虑放大纯化,制备的问题吧。

制备色谱不简单,很复杂。你要掌握的还多。

物质是否能够分离开最关键的是色谱柱的选择,而示差折光检测器仅是从物质的折光系数来判断是否是相同的。所以你用RID检测器看到的独立组分极有可能是混合物,而不是你希望的纯物质。所以你也不用惊讶。建议:你的这个问题的核心在于色谱柱的选型,即选择合适的色谱柱及色谱条件把你希望的组分分离开,再考虑放大纯化,制备的问题吧。制备色谱不简单,很复杂。你要…

制备色谱技术问题?

可以配一个PDA,另外加一个示差折光410,另外买几根制备柱就可以了。waters600的流速最大为20mL/min,一般可以配20mm ID的制备柱,一次分离10-100mg的样品,如果样品量更大,可以通过配件扩展到45mL/min,使用30mm ID的制备柱。另外为了保证馏分收集的准确性,最好配上Fraction II 馏分收集器。 如果样品数量很大,可以配2767 sample manager和ZQ MS, 同时做自动进样并通过MS或UV信号自动收集馏分。这样可以过夜自动运行。最大通量每天可以处理100-200个样品。

可以配一个PDA,另外加一个示差折光410,另外买几根制备柱就可以了。waters600的流速最大为20mL/min,一般可以配20mm ID的制备柱,一次分离10-100mg的样品,如果样品量更大,可以通过配件扩展到45mL/min,使用30mm ID的制备柱。另外为了保证馏分收集的准确性,最好配上Fraction II 馏分收集器。&…

溶解度太低该怎么上制备HPLC?

首先,得了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质,通过调节溶剂的pH值等, 以达到较好的溶解度;
2)样品可能某种晶型难溶,这样可以加入其他溶剂(如丙酮等)增加其溶剂型;
3)不是一定要用流动相来溶解样品,对溶解度差的样品,可以选择甲醇,THFDMSO等溶解样品。特别是DMSO,对一般的化合物溶解度都很好,并且在反相柱上不保留,不会造成干扰。而且DMSO的洗脱能力很弱,一般不会影响峰型。
4)也可以固体上样

首先,得了解一下样品的性质,根据其酸碱性,极性等性质,通过调节溶剂的pH值等, 以达到较好的溶解度; (2)样品可能某种晶型难溶,这样可以加入其他溶剂(如丙酮等)增加其溶剂型; (3)不是一定要用流动相来溶解样品,对溶解度差的样品,可以选择甲醇,THF或DMSO等溶解样品。特别是DMSO,对一般的化合物溶解度都很好,并且在反相柱上不保…

溶解度太低该怎么上制备HPLC?

郝健翔
郝健翔
,不会练摊的工程师不是好律师

利用溶剂压制技术.

利用溶剂压制技术.

制备色谱柱压

虎晓
虎晓
柱压大小与流动相组成、流速、柱子直径和填料的颗粒大小有关。
柱压大小与流动相组成、流速、柱子直径和填料的颗粒大小有关。

制备色谱柱压

没有严格的标准。一般与柱子材质、长度、内径、填料颗粒大小、孔径、填料种类、流动相组成、流速、温度等有关。柱压随流动相的变化而变化。
没有严格的标准。一般与柱子材质、长度、内径、填料颗粒大小、孔径、填料种类、流动相组成、流速、温度等有关。柱压随流动相的变化而变化。…

分析色谱与制备色谱到底有什么关系?

分析色谱是制备色谱的基础。

当我们在分析色谱上取得了良好的分离效果时,可以将其放大,应用到制备色谱上,由此,我们需要考虑调整上样量,流速,梯度:

1.上样量的调整:他与分析色谱柱和制备色谱柱的柱长和柱内径有关:

具体关系是;制备柱上样量/分析柱上样量=制备柱长/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平方;

2.流速的调整:制备柱流速/分析柱流速=制备柱体积/分析柱体积=制备柱长/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平方;

3.梯度的调整:制备柱梯度/分析柱梯度=制备柱体积/分析柱体积*制备柱流速/分析柱流速;



制备色谱与分析色谱有啥关系?

很多初接触色谱领域的朋友对制备色谱这个名词比较陌生。其实,在化学化工医药等广泛采用的层析法以及薄层色谱就是最为典型的制备色谱,换句话说,将分析色谱的进样量增大,同时得出大量的所需物质(馏分)的过程就可以称为制备色谱。分析色谱的目的,是分析出混合物中一个(或者几个)纯物质的含量。制备色谱的目的,是从混合物中得到纯物质。而制备色谱系统则是利用制备色谱的思想高效能得到纯化物质的多个分析测试设备联用的总称。


制备色谱能当分析色谱用吗?

目前,很多客户的要求都倾向于买一台液相能同时解决制备和分析的所有问题,那就相当OK。这样的客户大多是科研经费紧张,好不容易批下来点钱,不想都花在后期纯化和分析上,所以最好二合一。

在我看来,分析液相和制备液相是通用的,只是精度的差别问题。比如,分析的液相一般流速在0.1~10mL/min,活塞的一个冲程大概是10μL,而普通的制备液相一般都是10~100mL的流速,因此活塞杆的尺寸也会变大,一个冲程差不多是100μL;流速的精度相对来说就差了很多。流速大了,管路也相应的粗了不少,以降低高流速带来的背景压力;但这样的仪器用于分析的话,柱后的扩散现象相当的厉害,即使在色谱柱上达到基线分离的两个峰,由于柱后扩散的作用,到达检测器的时候,差不多又会合到一起了;另外就是检测器的差异,主要是检测池的大小和狭缝的大小不同带来的灵敏度的不同。制备仪器一般灵敏度是分析的1/20,以保证大量进样后,不会超过量程太多而平头,分不清到底分没分开了。

倒是有个折中的办法,就是买分析型的液相,然后接个半制备的色谱柱。半制备就是直径一厘米的柱子,流速5mL以内,因此这个分析液相能达到;进样量大约是分析柱的10~20倍,检测器可能会平头,没关系,换个波长,找个吸收较弱的波长当检测波长就OK了,不是大量制备的话,我想基本可以满足需要了。


小结:分析色谱,制备色谱与工业色谱的主要区别?

1.分析色谱:在乎分析结果,对化验结果的纯度,比例等要求准确,而对收率,浓度等产品参数不在乎,一次进料,而且每次进料少。

2.工业色谱:比较在乎产品的浓度和收率,还有纯度,工业化生产是连续进料。

3.制备色谱:介于两者之间,一般用于做单柱试验。

【来源:实验与分析】

分析色谱是制备色谱的基础。当我们在分析色谱上取得了良好的分离效果时,可以将其放大,应用到制备色谱上,由此,我们需要考虑调整上样量,流速,梯度:1.上样量的调整:他与分析色谱柱和制备色谱柱的柱长和柱内径有关:具体关系是;制备柱上样量/分析柱上样量=制备柱长/分析柱长*制备柱内径的平方/分析柱内径的平方;2.流速的调整:制备柱流速/分析柱流速…

制备液相色谱仪清洗液进不去,疑似进样阀堵了,怎么处理啊?

郝健翔
郝健翔
,不会练摊的工程师不是好律师
  1. 查看进样前和进样后的流量,拆开不同的接口,看对应接口是否有液体流出判断是哪里堵了,然后超声清洗。

查看进样前和进样后的流量,拆开不同的接口,看对应接口是否有液体流出判断是哪里堵了,然后超声清洗。

两年多没用的制备柱可否处理后再次利用?如何处理?

郝健翔
郝健翔
,不会练摊的工程师不是好律师

平衡色谱柱 反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存 或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;

如果您所 使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。

如果该色谱柱需要使用含水的流动相,请在使用流动相 之前用乙醇或异丙醇平衡

 如何平衡色谱柱?

平衡过程中,将流速缓慢地提高用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线(缓冲盐或离子对试剂度如果较低,则需要较长的时间来平衡)

极性固定相(如Si,NH2*,DIOL基色谱填料)的再生: 正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**

非极性固定相(如反相色谱填料RP-18,RP-8,CN等)的再生:水→乙腈→氯仿(或异丙醇)→乙腈→水0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱

                                                                                                                                                                                            ——转自网络

平衡色谱柱 反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存 或运输过程中可能会干掉,因此在用流动相分析样品之前,应使用10-20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱;如果您所 使用的流动相中含有缓冲盐,应注意用纯水"过渡"。硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在…
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